血细胞分析仪是临床检验最常用的仪器之一。血细胞分析仪的应用,不但提高了工作效率和质量,而且为临床提供了更多具有临床价值的参数,对疾病的诊断治疗有着重要的意义。在实际工作中常常会受到一些异常因素的干扰。在此主要讨论血细胞分析过程中标本自身的干扰因素及纠正措施,以确保我们检测结果的准确、可靠。常见的干扰因素如下。
01 RBC受干扰常见因素
冷凝标本:冷凝集素病是免疫球蛋白M(IgM)抗体引起的自身免疫病。其特点是在较低的温度下,某些疾病患者自身的红细胞与这种抗体发生凝集。血液冷凝集对红细胞计数及其各项参数的检测都能造成很大影响。
研究表明,冷凝集素可以导致WBC、MCV假性增高,RBC、HCT、PLT假性减低,特别是RBC、HCT降低尤为显著,但RBC、HB、HCT 3个参数结果之间的关系明显不符,并由此造成MCH、MCHC等计算结果异常增高。
纠正措施:将标本放入37℃水浴箱30min ,立即上机检测,各个参数基本恢复正常。
脂血标本:脂血是最常见的干扰因素。由于血红蛋白检测原理是比色法,引起血清浊度增大的因素(如高脂血症、异常血浆蛋白质、WBC>50*109/L等)都可导致其假性增高,进而引起MCH、MCHC显著增加。
处理方法:缓慢离心,吸取血浆加入等量的稀释液。
免疫球蛋白的干扰:巨球蛋白血症和多发性骨髓瘤时血浆中IgM 增高,高浓度的免疫球蛋白干扰了溶血剂的作用,引起MCHC假性增高。
解决办法:稀释样本或吸取血浆加入等量的稀释液。
溶血标本:正常血清中游离血浆血红蛋白正常参考范围为:10-40mg/L,与红细胞内的血红蛋白一起检测时,不会引起红细胞内的血红蛋白增高。但在病理情况下,某些伤害(如毒蛇咬伤后)诱发的弥漫性血管内凝血(DIC)、药物、输血或采血不顺利等因素可引起标本溶血,血浆游离血红蛋白增加,可使MCHC假性增高,RBC明显减少。
纠正措施:观察血涂片是否有较多RBC碎片,或与临床联系,重新采集标本。
02 WBC常受的干扰因素
有核RBC:由于正常情况下RBC的数量约是WBC的1000倍,会引起白细胞总数和淋巴细胞总数及其比例显著假性增高。特别在某些疾病如溶血性贫血时,外周血中可出现大量有核RBC,它不能被稀释液破坏,而使WBC计数偏高。
部分五分类血细胞分析仪会提示有核RBC存在,部分五分类仪器(迈瑞BC-6800/6900等)也会计数有核RBC并自动校正而直接给出准确的WBC计数结果。
纠正措施:手工分类计数100个WBC遇到的有核RBC数,依据WBC校正公式进行计算
巨大PLT标本:某些血液系统疾病患者血液中可能出现与WBC大小相同的巨大PLT,这些巨大PLT被当作WBC计数,使WBC假性增高。
纠正措施:用手工方法对WBC进行计数。
难溶血或溶血不良标本:严重肝病患者由于RBC膜抗溶性增强。
纠正方法:采用手工方法计数WBC;用某些不受干扰的仪器检测,排除干扰。
高浓度胆红素:高浓度胆红素影响WBC的计数和分群。在游离胆红素为192.1μmol/L时,对WBC的计数和分群影响很小,256.1μmol/L时影响显著,384.1μmol/L时对WBC的计数影响显著,仪器无法分群。
纠正方法:采用手工方法计数WBC。
03 PLT常受的干扰因素
小细胞性贫血标本:缺铁性贫血、地中海贫血等患者的小细胞对某些仪器PLT的计数有明显干扰。一般电阻抗法血液分析仪将30-36fL的颗粒或到60fl(部分光学法仪器)的颗粒设置为PLT。
电阻抗法血细胞分析仪,仅能识别颗粒大小,不能区分颗粒性质。当MCV<70fl时,血细胞分析仪的PLT计数容易受小细胞的干扰而假性增高。一些高档血细胞分析仪可以抗小红细胞的干扰。主要是这些仪器采用了光学法的流式细胞学计数原理检测PLT。
纠正措施:用微镜重新计数PLT或者采用光学法流式血细胞分析仪检测血小板。
PLT聚集:①采血不顺利时引起血小板破坏和聚集,可使血小板计数假性降低。措施:重新采集血液或者手工方法计数PLT。②EDTA-K2抗凝,PLT形态逐渐变为球形,体积增大,且可引起PLT聚集。造成血分析仪不能辨认,引起PLT假性减少。
纠正措施:用不含EDTA抗凝剂稀释液立即稀释标本或显微镜重新计数PLT,同时要观察血涂片是否有PLT集聚。
PLT卫星现象:由EDTA抗凝剂诱导引起的PLT围绕在中性粒细胞或淋巴细胞/淋巴瘤细胞周围,形成卫星现象。一般引起PLT中度减少。
纠正措施:立即稀释标本检测。
细胞碎片:血细胞分析仪不能完全将PLT与其他类似大小物质,如红细胞碎片或白细胞碎片、灰尘等区别,引起PLT假性增高。
纠正方法:用显微镜手工计数PLT。
04 其他
微生物包括细菌、真菌、疟原虫等也会干扰WBC、PLT检测。
综上所述,由于某些疾病的原因,造成血液标本性质的改变。血液分析仪在血细胞检测的过程中,常受标本自身的干扰因素是不可忽视的。这就要求检验人员要从中找到正确的解决办法,力求结果准确,为临床提供一个可靠的诊断依据。
来源:迈瑞体外诊断