前言
临床生化检验中反应曲线可以监控生化反应的全过程,不同的反应曲线能够把标本、试剂与仪器的质量等情况给予全面系统的反映出来。进而则能够将标本、检测、质量控制、定标过程出现问题尽早的发现与处理,对检验结果的正确有效性,发挥关键的保障效果,并且也能够有效地防止出现医疗矛盾,是临床检验工作发现问题和解决问题的重要参考依据。
下面叙述的是一例借助生化反应曲线揭示引起尿酸值忽高忽低的原因。
案例经过
某日早上进行生化报告审核的时候遇到一位尿酸结果为1263μmol/L,查看其病人的病情诊断为高血压,高尿酸血症是一种嘌呤代谢紊乱性疾病,痛风、慢性肾病、高血压、心脑血管系统等疾病均可由高尿酸血症引起且高尿酸血症是引起高血压的危险因素之一[1]。虽患者的病情与症状与之相符,但由于结果过高出于严谨还是对其重新进行复查并查看了该病人标本所在仪器上的反应曲线。
(图一)
本室所用的生化仪器为西门子ADVIA2400,将该病人的标本分别用原仪器(以下简称2机)以及另一台参与过卫生部室间比对的仪器(以下简称1机)重新进行复查,结果却令人大吃一惊,标本重新检测后在1机的结果为601μmol/L,2机的结果为606μmol/L,反应曲线如下:
(图二)
为何两次的结果差距会如此大?
笔者首先核对了患者的信息,信息无误:检查了标本的状态,无溶血,黄疸,脂血。其次当天的质控以及仪器状态都良好。是偶然误差吗?于是笔者便同时核查了这个标本前后的几个标本(57号,59号,61号)的反应曲线并重新进行了检测,同上面标本一样,复查前后尿酸的结果差距很大。如图所示:
(图三)
(图四)
案例分析
生化的反应曲线是项目检测整个过程的记录,相当于是一个静态的录像过程。因此我们便利用分析反应曲线是否有异常来探索为何这尿酸结果忽高忽低。
那么在分析以上反应曲线是否异常之前,我们先来了解下何为正常曲线。
本室所用的仪器为西门子ADVIA2400,在这个过程中试剂R1,样本S以及试剂R2的加入以及搅拌过程以及时间点都是固定的,其加样时间为2秒,读取一个点时间大概是14秒左右,R1+S后读第一点,加入R2试剂反应一段时间达到平衡,共计41个点,约用时十分钟左右。如图所示:
正常的反应曲线应该具备哪些特点呢?
1.比较光滑,无明显的跳点;
2.加入R2前后吸光度会发生明显的变化(低浓度的样本除外)
3.终点法的反应曲线,会有一段曲线的吸光度基本无变化 ;
4.速率法的反应曲线,基本成一条直线(两点速率法除外)。
回到该案例中,其尿酸项目所采用的方法学为尿酸酶法,是以终点法反应形式对复合物的吸光度进行检测。终点法是一种或两种试剂,在样品和试剂混合后,吸光度会增加(或降低)之后反应达到平衡,使全部底物(被测物)转变成产物。吸光度的增加(或降低)程度与被测物的浓度成正比,称之为终点法,一般来说,终点反应对样品和试剂的准确递送更敏感。
观察反应曲线发现在R1试剂+样本这个阶段有明显的曲线波动(如图一),此外该患者前后几个标本尿酸的反应曲线也出现类似的波动(图三)。
仪器原因?样本原因还是试剂原因呢?
翻看了其他不同项目的反应曲线都正常而单单尿酸的反应曲线异常,因此仪器原因可排除。标本状态以及质控问题前面已经排除。
那是否是试剂所引起的呢?
查看了报警信息发现其在该标本时间点左右曾报警提示过试剂剩余量不足,更换试剂后发现没有出现类似的情况同时查看了复查后标本的反应曲线是光滑、无波动的。由此可以确定前后两次结果差距大是由于试剂量不足所导致的。分析原因可能是试剂底部由于开瓶过久后试剂劣化所导致性能较差,而引起试剂本底的吸光度过高所得的结果不可靠,其所反应的就不是患者真实的数据。试剂是保证检测实验结果质量的关键因素之一,当遇到检测结果有问题,快速排除试剂因素也是非常有必要的[2]。
知识延伸
不同的反应曲线能够把标本、试剂与仪器的质量等情况给予全面系统的反映出来。进而则能够标本、检测、质量控制、定标过程出现问题尽早的发现与处理,对检验结果的正确有效性,发挥关键的保障效果,并且也能够有效地防止出现医疗矛盾。那么导致生化反应曲线异常的原因还有哪些呢?
案例总结
随着高科技的发展,仪器自动化的程度越来越精湛,生化仪自动化流水线已普遍应用,可是仪器只是会按照规定好的步骤一步步运行,因此也容易出现盲区,无法自动处理一些疑难杂症,这时候就需要我们检验人对于所出现的问题进行一一排除,进行监控,而反应曲线则是一个检验者与仪器间很好的桥梁,不同的反应曲线可以反应仪器、试 剂、校准、质控、标本等问题,及时有效的发现失控或错误发生的原因[3],有利于在在分析前,分析中和分析后进行全面的质量控制,有利于保证检验结果的可靠性,为临床提供更好的服务,为病人提供更精准的结果。
华西医院的李贵星教授曾说过:检验报告的发出,不是工作的结束,而是医疗行为的开始,检验结果不是为了一个“果”,而是为了一个“因”,因此作为一名合格的检验人,我们应该以严谨的态度认真的对待每一份报告。
参考文献
1.赵玉荣, et al., 高尿酸血症与高血压关系的研究进展 %J 中国现代医生. 2022. 60(20): p. 109-111+115.
2.陈燕, et al., 临床生化实验室测试过程中分析生化反应曲线对于试剂质量评估作用的探讨 %J 标记免疫分析与临床. 2017. 24(04): p. 456-459.
3.郗志华, 浅谈西门子生化仪反应曲线 %J 山西职工医学院学报. 2017. 27(04): p. 25-27.
作者:陈美娜 泉州市中医院检验科
编辑:糖糖