血液培养常见问题你知道多少

血培养是一种将新鲜离体的血液标本接种于营养培养基上，在一定温度、湿度等条件下，使对营养要求较高的细菌生长繁殖并对其进行鉴别，从而确定病原菌的一种人工培养法。

血培养是临床诊断败血症的重要方法，目前是临床上诊断败血症的金标准，也是获得血流感染病原菌，并进行下一步鉴定药敏试验的主要途径。阳性结果对明确诊断、对症治疗有极高的应用价值。但据文献报道目前国内的血培养阳性率仅为17.8%和18.4%。为了提高血培养的阳性率，客观的反映出败血症患者血内存在病原菌的实际状况，临床医生精确选用血培养，检验科室精心分离鉴定。

怀疑血流感染时应在什么时间采血最好？

尽可能在患者寒战开始时、发热高峰前 0.5～1h 内采血；也可于寒战或发烧后 1h 进行；

在患者接受抗菌药物治疗前采血；

如患者已经应用抗菌药物进行治疗，应在下一次用药之前采血培养；

无需同时或短时间内完成几套血培养采集， 除非怀疑存在持续性菌血症时 （如亚急性感染性心内膜炎）。

为什么每套标本中应包含厌氧培养？

厌氧培养能提高厌氧菌感染患者的诊断率；

提高临床兼性厌氧菌的检出率；

注：

（1）厌氧瓶除了检出厌氧菌，另外对葡萄球菌、肠杆菌菌科细菌以及苛氧菌的检测有优势。

（2）资料显示 16% 的链球菌和 17% 的肠杆菌科细菌血培养时仅厌氧瓶报告阳性。

（3）有研究者对 7072 份同时做需氧瓶和厌氧瓶的血培养结果分析显示，640 份血培养阳性，阳性率为 9%，其中需氧和厌氧瓶同时阳性为 55%，仅需氧瓶阳性为 26%，仅厌氧瓶阳性为 19%。研究显示需氧瓶有 9% 比厌氧瓶早 1 天报告阳性结果，而厌氧瓶有 5% 比需氧瓶早 1 天报告阳性结果。

采血量和血培养的数量

采血量：对从菌血症或真菌菌血症病人血培养中获得的微生物，每个培养瓶抽取的血量是唯一重要的变量。对婴幼儿和儿童，一般采血1~5ml用于血培养。成人血培养的标本量为10ml，血液和肉汤比一般推荐为1:5~10。儿童按年龄和体重采集足够的血量，不超过患儿总血量的 1%；新生儿≥0.5ml/瓶；婴幼儿（1～36个月）≥1.0ml/瓶；（≥36个月）≥4.0ml/瓶；

血培养的数量：血培养的数量和采血时间关系到菌血症的病理生理学，一次静脉采血注入到多个培养瓶中应视为单份血培养。一般而言，采集血培养都应该在使用抗生素之前进行，推荐同时采集2~3份血。成人最少 2 套，3 套更好;儿童一般只采需氧培养瓶。

研究表明，不同血培养套数检测灵敏度不同，

1 套为 73.2%；2 套为 93.9%；3 套为 96.9%

采集后的血液注入顺序

血量充足：先注厌氧瓶，后注需氧瓶，避免空气进入；

血量不足：优先注入需氧瓶，剩余注入厌氧瓶，因为多数菌血症是由需氧菌和兼性需氧菌导致的。

（用 75% 乙醇消毒培养瓶瓶塞，待干，将血标本分别注入需氧瓶和厌氧瓶内，迅速轻摇，混匀。）

血培养采集的流程

假阳性怎么处理？

对于血培养的假阳性一直是困扰临床的问题，而且判断假阳性比较困难，很难确认是否是假阳性还是其他种种原因造成的转种失败，因而目前将血培养常见的假阳性和转种失败的原因进行总结分析，以供判断。

环境原因

1、剧烈的温度变化

实验室环境温度剧烈变化造成血培养的生长曲线波动而导致的假阳性，建议维持实验室的温度相对恒定，室温保持在15~25℃之间。仪器避免阳光直射或空调吹风口。

2、供电电压

仪器连接的电压不稳定或同一电源下连接其他大功率的设备，并且有频繁使用，引发电压波动。会导致生长曲线因电压而波动。建议如果电压不稳可以考虑配置稳压电源，不要将血培养仪和大功率的电器设备例如灭菌锅，离心机等位于同一线路上。

仪器和培养瓶的原因

1、仪器

仪器是否按时保养和校准。此外在校准空位的过程中，需要保证仪器中没有正在培养的血培养瓶，不然可能会报告假阳性。

2、血培养瓶

确认血培养瓶的送检流程符合要求，在送检过程中无剧烈的问题变化。如果血培养瓶不能及时上机，建议在室温进行保存。在35℃保存时间超过12小时或放2-8℃冰箱保存可能会造成漏检或假阳性。

在血培养瓶上机前检查，标签是否完整，是否过期，培养基底部是否变色。培养瓶需要常温避光保存，避免阳光直射。

样本因素或其他原因

1、采血量

采血量过多或过少，血液细胞本身也能代谢产生CO2，无菌血液在血培养瓶培养时也会产生本地曲线的变化，当采血量过多的时候可能会造成假阳性，因而建议控制采血量。此外对于部分肿瘤病人，由于其血液细胞的代谢率较高，也可能引发假阳性，对于这部分病人目前尚无完美的解决方法。

2、对于阳性标本的转种失败误判假阳性

血培养标本阳性后需要进行染色图片和转种。推荐使用含血的BHI琼脂进行培养，使用一般哥伦比亚血平板，对于一些营养条件要求较高的细菌可能会传代失败。如果发现血培养涂片有菌，而转种失败的情况，建议更换营养条件更高的培养基进行传代。此外部分菌株存在自溶现象，如果报阳后不能及时转种也有可能转种失败。

如何判断假阳性

如果血培养仪报阳，而转种无细菌生长，如何分析是假阳性或者是转种失败呢？

1、血培养直接涂片

对于所有血培养报阳的血培养瓶必须进行直接染色图片镜检，有条件可以联系临床发送1级报告。如果直接镜检阳性，而转种无细菌生长，转种失败的可能性极大，建议SN或FN的阳性瓶使用厌氧平板转种并在使用厌氧环境进行培养，对于PF，SA，FA的阳性瓶，使用含血的BHI琼脂进行转种。

2、再次培养

如果血培养直接涂片找不到细菌，且转种平板也为阴性，建议可以将报阳血培养瓶抽出10ml打入新的血培养瓶重新进行培养，如果仍报阳，基本可以判断是传代过程的问题，如果5天后报阴，基本是假阳性。

3、对于生长曲线的判断

对于阳性瓶建议对生长曲线进行观察，确认曲线是否连续，是否有断点或较大波动，如果存在可能有设备方面的问题，可以联系厂家或代理商工程师进行设备的检查和校准。